Kemiluminesenssi-immunomääritys, CLIA, on erittäin herkkä immunomääritystekniikka.
1. Periaate
Kemiluminesenssi-immunomääritys yhdistää immuunivasteen spesifisyyden ja kemiluminesenssin korkean herkkyyden. Sen perusperiaate on yhdistää spesifinen immuunivaste antigeenin ja vasta-aineen välillä kemiluminesenssireaktioon. Tarkemmin sanottuna testattavan näytteen antigeeni yhdistyy spesifisen vasta-aineen kanssa immuunikompleksin muodostamiseksi. Sitten kemiallisten reaktioiden sarjan kautta immuunikompleksi tuottaa kemiluminesenssisignaalin. Luminesenssivoimakkuus on verrannollinen testattavan antigeenin pitoisuuteen, ja testattavan antigeenin pitoisuus voidaan analysoida kvantitatiivisesti luminesenssin intensiteetin havaitsemisen avulla.
2. Pääkomponentit
Vasta-aineet: mukaan lukien sieppausvasta-aineet ja tunnistusvasta-aineet. Sieppausvasta-aine kiinnitetään yleensä kiinteän faasin kantajalle testattavan antigeenin sieppaamiseksi. Havaitsemisvasta-aine yhdistetään kemiluminesenssimarkkeriin immuunikompleksissa olevan antigeenin havaitsemiseksi.
Kiinteän faasin kantaja: kuten mikrolevyt, magneettihelmet jne., joita käytetään sieppausvasta-aineen kiinnittämiseen immuunireaktion ja erottamisen ja pesun helpottamiseksi.
Kemiluminesoiva merkkiaine: yleensä aine, joka voi tuottaa luminoivan signaalin kemiallisessa reaktiossa, kuten luminoli, akridiniumesteri jne. Markkeri yhdistyy detektiovasta-aineeseen tuottaakseen kemiluminoivan signaalin immuunireaktion jälkeen.
Ilmaisujärjestelmä: mukaan lukien laitteet, kuten luminesenssiilmaisimet, joita käytetään havaitsemaan kemiluminesenssisignaalien intensiteetti ja muuttamaan ne luettavissa oleviksi arvoiksi.
3. Ominaisuudet
Suuri herkkyys: Se pystyy havaitsemaan erittäin pieniä testiaineen pitoisuuksia, jotka ovat yleensä useita suuruusluokkaa herkempiä kuin perinteiset immuunimääritysmenetelmät.
Laaja lineaarinen alue: Testiaineen pitoisuus voidaan mitata tarkasti laajalla pitoisuusalueella ilman useita laimennuksia.
Vahva spesifisyys: Antigeenin ja vasta-aineen spesifisen sitoutumisen perusteella se on erittäin selektiivinen tietyille testiaineille.
Nopea: Havaintoprosessi on suhteellisen nopea ja tulokset saadaan yleensä lyhyemmässä ajassa.
Korkea automaatioaste: Se soveltuu laajamittaisten näytteiden havaitsemiseen ja sitä voidaan käyttää yhdessä automaattisten instrumenttien kanssa tunnistustehokkuuden parantamiseksi.
4. Käyttöalueet
Kliininen diagnoosi: Sitä käytetään havaitsemaan erilaisia biomarkkereita, kuten kasvainmarkkereita, hormoneja, tartuntatautimarkkereita jne., tarjoamaan tärkeä perusta sairauden diagnoosille, hoidon seurannalle ja ennusteen arvioinnille.
Lääkekehitys: Sitä käytetään lääkepitoisuuden seurantaan, tehokkuuden arviointiin ja lääkeaineenvaihduntatutkimukseen.
Elintarviketurvallisuustestaus: Haitallisten aineiden, torjunta-ainejäämien, eläinlääkejäämien jne. havaitseminen elintarvikkeista.
Ympäristön seuranta: Ympäristössä olevien epäpuhtauksien ja myrkyllisten aineiden havaitseminen.